Sam Caldwell- w jego postać wcielamy się na samym początku gry. Był inżynierem na kolonii Aegis VII, który został wezwany do pomocy przy wydobyciu tajemniczego Znacznika. Niestety od tego czasu cała załoga dostaje dziwnych halucynacji i wszyscy zaczynają zmieniać się w potwory o popełniać samobójstwa. Dosięga to także samego Sam'a i ginie z rąk oddziału ochrony. Jego dziewczyną była Lexine Murdoch.

Nathan McNeill- emerytowany detektyw działu ochrony. Jest drugą grywalną postacią, którą zaczynamy kierować już w drugim rozdziale (zaraz po zabiciu Sam Caldwell'a). Były weteran wojny prowadzonej o surowce na Ziemii. Należał do tego samego oddziału co Gabe Weller. Niestety w jej wyniku zostaje ranny i przeniesiony, jako detektyw do kolonii Aegis VII.

Gabriel Weller- sierżant ochrony Ishimury. Podczas wybuchu epidemii Nekroformów stacjonował na Ishimurze. Powierzona została mu misjia odzyskania ciał ludzi z kostnicy z kolonii Aegis VII, którzy popełnili samobójstwo przez obecność Znacznika. Tam odnalazł swojego starego kompana Nathan McNeil, który od tamtego czasu towarzyszy mu i pomaga przetrwać.

Lexine Murdoch- jest rzeczoznawcą na Aegis VII, gdzie przeprowadziła się wraz z ojcem. Zakochana w Sam'ie Caldwell'u, co możemy zobaczyć dzięki transmisji video prowadzonej z Samem na początku gry. Uratowana przez Nathan'a McNeill'a i Gabriel'a Weller'a towarzyszy do samego końca gry.

Warren Eckhardt- kolonialny dyrektor CEC do spraw górnictwa. Został wysłany na USG Ishimurę, by nadzorować ich pracę, lecz tak naprawdę dostał zadanie odnalezienia osoby odpornej na działanie Znacznika, którą jak sądzi jest Lexine Murdoch. Ginie w ósmym rozdziale gry.

Catherine Howel- doktor i botanista na pokładzie USG Ishimura. Była jedną z nieliczynych osób, które przetrwały ataki Nekformów. To ona przedstawiła ich dokładnych opis na podstawie swych badań. W jej postać wcielamy się w rozdziale 7. Zostaje porzucona przez Warrena Eckhardt'a, co powoduje jej śmierć.